婴幼儿奶粉中阪崎克罗诺杆菌隐性污染状况分析及针对性检测技术研究进展(一)
婴幼儿奶粉中存在的婴幼阪崎克罗诺杆菌对婴幼儿危害性极强,卫生标准中对该微生物有严格限制,儿奶但检出现象仍然时有发生。粉中阪崎克罗诺杆菌在婴幼儿奶粉生产线中的阪崎潜伏存在多种因素,本文阐述了其在生产空间中的克罗况分暴露特征,重点论述逆境胁迫下该菌耐受表型和活的诺杆非可培养表型形成的隐性污染对监测和清除污染残留不利。讨论了各类检测技术的菌隐究进优缺点,强调检测灵敏度、性污析及性检回收率和区分活的染状非可培养状态菌对于控制隐性污染的重要性。以期为阪崎克罗诺杆菌的针对展监测和防控提供新思路,为保障婴幼儿奶粉生产安全提供参考和建议。测技
婴幼儿奶粉(Powdered Infant Fomula,术研PIF)作为婴幼儿母乳替代品被广泛使用,婴幼其安全性一直是儿奶关注重点。婴幼儿食品在加工过程中很容易受到各种致病菌污染,粉中而婴幼儿自身免疫功能尚不成熟,相比其他人群更容易感染食源性致病菌。阪崎克罗诺杆菌是PIF微生物重点检测指标,感染后能导致婴幼儿患病甚至死亡,对婴幼儿危害性极强。
因此我国国家标准GB10765-2010《婴儿配方食品》中严格规定阪崎克罗诺杆菌在PIF中检出限为0 CFU/100g,需要高效准确的检测技术实现对该菌的检出。然而目前PIF中阪崎克罗诺杆菌污染途径和污染控制方法仍然存在许多未知,耐受表型的存在为该菌的清除增加困难,“活的非可培养状态”表型阪崎克罗诺杆菌在PIF中的污染情况也没有引起足够的重视,明确细菌数量存在困难,形成的隐形污染造成阪崎克罗诺杆菌漏检,人类了解和控制阪崎克罗诺杆菌污染处于不利处境。
目前相关检测方法致力于检出痕量存在的阪崎克罗诺杆菌,同时防止“活的非可培养状态”表型被漏检,各种PCR技术和免疫检测方法被运用,灵敏度提升和“活的非可培养状态”菌的定量研究获得一定成效,不过这些方法大多需要长时间富集来提高回收率和灵敏度,增加了时间消耗,未来需要在着重提高检测灵敏度的同时简化流程、提升效率、区分“活的非可培养状态”菌,开发出具有针对性的检测技术,以期保障婴幼儿奶粉产品安全。本文通过PIF生产中阪崎克罗诺杆菌的暴露情况,分析了该菌在PIF生产环境胁迫下的耐受表型和“活的非可培养状态”表型存在的潜在污染,归纳了针对性的新型检测方法应用来提高PIF安全性的方法,为PIF阪崎克罗诺杆菌污染防控提供参考。
1阪崎克罗诺杆菌的危害性
阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii),克罗诺杆菌属,肠杆菌科,原先被称为阪崎肠杆菌,能引起新生儿、早产儿、低体重出生的婴儿等免疫力低下人群感染坏死性小肠结肠炎、败血症、脑膜炎和严重的神经系统后遗症甚至死亡。虽然该菌对婴幼儿感染概率低,但致病率死亡率极高,研究报道阪崎克罗诺杆菌导致新生儿患病后死亡的概率为26.9%~80%,严重威胁婴幼儿安全。
作为最受关注的PIF微生物危害,虽然阪崎克罗诺杆菌感染途径和方式尚不十分明确,但大部分阪崎克罗诺杆菌感染病例与PIF污染的因果关系已被证实,该菌被FAO-WHO列为与PIF相关的A类致病菌。一项报道中提到全球绝大多数病例报告来自美国、英国、法国、比利时和菲律宾五个国家,但需要注意一些非发达地区对该菌的认识和研究有限,如表1近5年国内外关于阪崎克罗诺杆菌在市售PIF中的部分监测报道显示,最常用的检测方法是基于选择性培养和生化鉴定的欧盟或美国的食品安全标准,容易漏检、灵敏度低,国内外关于阪崎克罗诺杆菌的监测数据和感染率报告仍然不足,可能存在没有获得准确的分离数据和监测研究报道的情况,所以该菌的污染是全球普遍问题。
我国自2011年将阪崎克罗诺杆菌加入婴幼儿配方奶粉微生物限量指标后,该菌在奶粉中的污染情况有所好转,检出率由2004年时的12.64%降低到2020年的0.6%,但商品PIF检出阪崎克罗诺杆菌指标不合格而被召回的情况仍有发生,PIF中存在的阪崎克罗诺杆菌污染和危害仍然需要警惕。
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